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人乳腺癌細胞-熒光素酶標記

簡要描述:MDA-MB-231-luc人乳腺癌細胞-熒光素酶標記
|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細胞|貼壁細胞|懸浮細胞|,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養條件

  • 產品型號:MDA-MB-231-luc
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2024-11-18
  • 訪  問  量:2217

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MDA-MB-231-luc人乳腺癌細胞-熒光素酶標記

二、細胞收到后處理


細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的好辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作,培養箱靜置2-4小時。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養液收集至離心管中,加入6ml*培養基,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養步驟。(注意發貨的是密封培養瓶的話,處理完后放入培養箱培養記得培養瓶蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶里面的*培養基,另外一瓶用自己配的*培養基)


三、細胞培養步驟


  1. 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL*培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

  2. 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。


1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養上清,用25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的*培養基終止消化。

3.輕輕吹打細胞,*脫落后吸出,在1000RP不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.M條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養液,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。


























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